banner
图片
新闻资讯
产品展示
行业新闻

您的当前位置:PK10 > 新闻资讯 > 行业新闻

PCR基因扩增仪的工作原理及保养

来源:上海般诺生物科技PK10 │ 发表时间:2017-09-20 | 浏览数:载入中...

PK10   PCR基因扩增仪的工作原理: PCR反应一般设置20~40次循环,每一循环包括高温变性、低温退火、中温延伸三步反应。每一循环的产物作为下一个循环的模板。PCR的扩增效率很高,如果循环次数是30次,那么新生DNA片段理论上达到230拷贝(约为109个分子)。 PCR反应每个循环的三个基本反应步骤如下:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA产物解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:温度升到72℃左右,DNA模板-引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链。重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需 2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。到达平台期(Plateau)所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。 PCR技术的特异性取决于引物与模板结合的特异性。 PCR仪也叫基因扩增仪,它是利用PCR技术对特定基因做体外的大量合成,用于以检测DNA/RNA为目的的各种基因分析。

  PCR基因扩增仪主要作用原理与基本计量仪器相似,对计量要素要求较高,一旦失控,仪器将不能正常工作,所以PCR基因扩增仪也需要定期保养,依赖自然风降温的PCR基因扩增仪尤需注意。

PK10   在仪器的维护保养中需要注意的问题:

PK10   1)PCR基因扩增仪需要定期检测,一般半年至少一次

PK10   2)PCR反应的要求温度与实际分布的反应温度是不一致的,当检测发现各孔平均温度差偏离设置温度大于1~2℃时,可以运用温度修正法纠正PCR实际反应温度差。

PK10   3)PCR反应过程的关键是升、降温过程的时间控制,要求越短越好,当PCR仪的降温过程超过60s,就应该检查仪器的制冷系统,对风冷制冷的PCR仪要较彻底地清理反应底座的灰尘;对其他制冷系统应检查相关的制冷部件。

  4)一般情况如能采用温度修正法纠正仪器的温度时,不要轻易打开或调整仪器的电子控制部件,必要时要请专业人员修理或利用仪器电子线路详细图纸进行维修。

9xqJi5Jm9srTklKlWc19kzH3QjV/vnFX2V/l07AYOjuTPQ+zTxwqWjuwTYFGQqp0B1U31hoxqSwq3CgUJuu0Nky1tLSzykpMNAxU9lx4xMuhxjWElUi+MqE/n9JNMOaNshsTptIyigtAzf8Iw9KX2XIT9qSD9tJaWlzRtogSWyCcmTBDpLaDxAdW/VWIcUDQEVax6upyXA6lWwm7VkQQxA== pk10开奖直播网开奖直播网站 PK10投注 PK10投注